1892年Viberti等用放射免疫试验发现尿中白蛋白排泄的增加率，可以预示胰岛素依赖性糖尿病肾病的发作。此时尿中总蛋白排泄正常，尿常规蛋白定量阴性，而尿白蛋白排泄却增加，称之为微量白蛋白尿。尿白蛋白( urinary albumin，u-ALB)是指在正常尿液中含量甚微的白蛋白，可早期反映肾脏异常;也可反映整个血管系统的改变，被认为是动脉病变的窗口。

尿白蛋白测定方法有两类:一类是染料结合法，另一类是免疫学方法。Sehosinsky最早报道用溴酚蓝染料结合法直接测定尿中白蛋白。此法虽简单、快速，但灵敏度低，尿中非蛋白成分会干扰BPB反应，不适宜测定微量的白蛋白尿。Jung等用凝胶过滤法，事先除去尿液中的干扰成分，用蛋白洗脱物同BPB反应，方法简单、方便，提高了灵敏度，排除了干扰，适宜基层单位使用，其特异性虽比免疫学法差，但可满足临床使用。最近发现了一种阴离子染料叫Albumin blue 580，对白蛋白有特别的选择性，高度特异地结合到白蛋白上，形成很强的荧光复合物，而其他蛋白质则无反应，此法试剂稳定、简单、快速，可与免疫学方法相媲美，已用于尿白蛋白测定，唯国内目前尚无试剂供应。免疫学方法有散射比浊法和透射比浊法两种。应用较多的是免疫透射比浊法，但报告方式不一，有的以每升尿中白蛋白量表示，有的以24小时排泄量表示，常用的报告方式是以白蛋白/肌酐比值报告，单位为mg/g。

将尿液标本事先用Sephadex G-50凝胶过滤，除去尿液中色素及其他干扰成分。将流出物加BPB染料，使之与白蛋白结合显色，经与同样显色的白蛋白标准液比较，可求得尿液中白蛋白含量。

1.洗脱液　154mmol/L NaCl溶液。

2. Sephadex G-50，Medium，50～150μl。

3.1mol/L甘氨酸缓冲液( pH 3.0)。

4.显色液　1.1mmol/L溴酚蓝。

5.白蛋白标准液　60mg/L (建议使用市售白蛋白标准品稀释)

层析柱内径1.2cm，高15cm，柱床体积约10.5ml。称取5g Sephadex G-50，加154mmol/L NaCl溶液100ml左右，置室温浸泡6小时，可装5支柱。柱床应均匀，无断裂或气泡。

将待检尿样先离心沉淀(或过滤)，再作蛋白定性。阴性者可直接上柱，若蛋白为+，则先用洗脱液稀释5倍，2 +则稀释10倍，3 +稀释15倍，4 +稀释20倍。

将尿样(或稀释尿) 3ml加于柱床上部的凝胶上，待样品完全进入凝胶后，弃去流出物，加入洗脱液洗脱，流速5ml/min，收集洗脱液6ml，混匀，供测定用。用过的凝胶柱可在柱床上部以50ml洗脱液连续洗柱，使干扰物质全部流出，即可供下次使用。

取15mm×100mm试管3支，分别标明空白、标准及测定，按表2-1-11进行。

混匀后30秒内，用分光光度计波长600nm，比色杯光径10mm，以154mmol/L NaCl溶液调节吸光度至零点，读取各管吸光度。

尿标本如果被稀释，结果应乘以稀释倍数。

成人尿白蛋白: 19.6～60.2mg/L尿液; 12.5～32.3mg/g尿液肌酐。

本法线性范围可达150mg/L，若尿中白蛋白含量超过此值，应将标本稀释后再作凝胶过滤。本法灵敏度高，检出限为5mg/L白蛋白，尤适合于微量的尿白蛋白测定。

白蛋白与溴酚蓝混合后30秒内显色达顶点，球蛋白显色在30秒后逐渐加深，至5分钟时方达顶点，为避免球蛋白的干扰，显色后应在30秒内读取吸光度。

胆红素、尿色素、药物(维生素B ₂)及其他非蛋白有机物，对本测定基本无干扰，它们都在凝胶过滤后已被洗脱出;尿中Hb浓度达37.2mg/L时，对本法有干扰，因Hb的相对分子质量为64 500，白蛋白的相对分子质量为65 000，十分接近，Hb在过柱时几乎与白蛋白同时洗脱出，无法分开。

尿液混浊，上柱前必须离心或过滤，否则将使结果偏高。

Sephadex G-50凝胶柱若有细菌生长，会使葡萄糖凝凝胶分解。此时应弃去，用新配的凝胶重新装柱。本法溴酚蓝最适浓度为1.1mmol/L，应当注意，空白管吸光度随着溴酚蓝浓度的增加而加大。

女性在经期收集尿液可能因携带额外的蛋白影响测定结果，要避免在经期进行测定。过量的运动也可能增加白蛋白的分泌，需要避免在运动后收集尿液。

尿液中的白蛋白与抗人白蛋白特异抗体在缓冲液中反应生成抗原-抗体复合物，产生浊度，与尿中白蛋白浓度呈正比例，用透射比浊法测定吸光度，与同样处理的标准品制备的标准曲线比较，求得尿液中白蛋白的浓度。

聚乙二醇　60g/L

Tris/HCl缓冲剂( pH 7.4)　 20mmol/L

NaCl　150mmol/L

Tris/HCl缓冲剂( pH 7.4)　 20mmol/L

NaCl　150mmol/L

制作标准曲线用，浓度分别为9.9mg/L、19.8mg/L、49.5mg/L、99.0mg/L和198mg/L。

1.以手工和半自动化分析仪为例，所有试剂和尿液标本，临用前都应平衡到室温。

2.主要参数

波长　340nm

比色皿光径　1cm

温度　37℃

3.按表2-1-12进行操作。

充分混匀，盖上塑料膜，在37℃保温20分钟;再次混匀，同样方法再读取各管最终吸光度为A ₂。

4.标准曲线的绘制　以上述5种浓度的标准液，分别制作5个标准管，同上操作测定吸光度。

以ΔA标准和对应的白蛋白浓度在半对数纸上作图，绘制标准曲线。

以ΔA样本查标准曲线，即可求得尿中白蛋白浓度。

成人尿白蛋白:

24小时尿:＜30mg/24h。

定时尿:＜20μg/min。

随机尿:＜30mg/g肌酐。

所有试剂均应储存于2～8℃，在有效期内使用。

本法线性范围在4～200mg/L。尿液白蛋白浓度超过500mg/L，受前带现象的影响，结果可呈假性降低。因此，分析前应以0.9% NaCl稀释使其浓度处于4～200mg/L范围内。

可用定时尿或随机尿标本进行测定。尿液若混浊，应于分析前离心或过滤。

高浓度水平的水杨酸盐( 5g/L)，能引起尿蛋白沉淀，使结果偏低。其他分析物在下列浓度以下时不产生干扰:

抗坏血酸　4g/L

胆红素　250mg/L

肌酐　4g/L

庆大霉素　10g/L

葡萄糖　40g/L

对乙酰氨基酚　5g/L

KCl　10g/L

NaCl　20g/L

尿素　40g/L

女性在经期收集尿液可能因携带额外的蛋白影响测定结果，因此要避免在经期进行测定。过量的运动可能增加白蛋白的分泌，需要避免在运动后收集尿液。

尿液中的白蛋白与抗人白蛋白特异抗体在缓冲液中反应生成抗原-抗体复合物。这些复合物会使穿过标本的光束发生散射。散射光的强度与标本中的相关蛋白浓度成正比。与已知的标准浓度对比即可得出结果。

尿白蛋白散射比浊法常采用与专门检测仪器设备配套的商品化试剂盒。主要包括但不限于以下成分:

1.抗-人白蛋白血清试剂

2.防腐剂

3.叠氮钠

4.蛋白标准液

5.反应缓冲液

6.试剂稀释剂

所有试剂和尿液标本，临用前都应平衡到室温。严格按照试剂说明书进行上机操作。

仪器通过多点定标的方式建立参考曲线。

成人尿白蛋白:＜30mg/L (此参考区间引自试剂说明书)。

所有试剂均应储存于2～8℃，在有效期内使用。

本法有一定的线性范围，尿液白蛋白若浓度超过500mg/L，结果可呈假性降低。因此，分析前应用稀释液以1∶5的比例进行稀释，并在一定时间内完成检测。

标本中的浑浊和颗粒可能干扰测量结果。因此含有颗粒的标本必须在检测前进行离心沉淀。

女性在经期收集尿液可能因携带额外的蛋白影响测定结果，因此要避免在经期进行测定。过量的运动也可能增加白蛋白的分泌，需要避免在运动后收集尿液。

白蛋白是血浆重要的蛋白质之一，在通常情况下，白蛋白的分子大，不能越过肾小球基底膜，即使有少量滤入原尿，也可被肾小管重吸收。因此，在健康人尿液中仅含有很低浓度的白蛋白。当肾小球基底膜受到损害(即使是早期的轻微受损)使其通透性改变时，白蛋白可进入尿液中，尿液白蛋白浓度持续升高，出现白蛋白尿。

临床上界定微量白蛋白尿:

24小时尿　30～299mg/24h

定时尿　20～199μg/min

随机尿　30～299mg/g肌酐

临床白蛋白尿:

24小时尿　300mg/24h

定时尿　200μg/min

随机尿　300mg/g肌酐

尿液白蛋白测定对早期发现肾脏功能改变及随后的治疗监控，其特异性和敏感度均比总蛋白高。高血压、糖尿病及系统性红斑狼疮等常伴有肾脏病变的缓慢进行性恶化，尿液白蛋白测定可较早发现这些异常。在糖尿病时，尿液白蛋白排泄量增加常伴随有肾小球滤过率增加。它发生于肾病的早期阶段，在肾组织学或结构改变之前即可检出，对预防糖尿病肾脏并发症的发生有着重要意义。

尿液中白蛋白排泄量变动很大，CV为45%～100%。文献报道的参考区间各不相同，尤其随机尿白蛋白的参考区间彼此相差更甚。Shihab指出未定时的尿液标本(随机尿)一次白蛋白排泄量增高，可能并无意义;如连续2～3次增高均超过参考区间方有诊断价值。某些进展缓慢的疾病，观察一段时期内尿液白蛋白排泄的改变，比一次测定结果更为重要。