血液中的葡萄糖可与血清蛋白的N末端发生非酶促的糖基化反应，形成高分子酮胺化合物，其结构类似果糖胺，总称为糖化血清蛋白。由于70%以上的糖化血清蛋白是糖化白蛋白，(其中也包含糖化球蛋白和微量糖化脂蛋白等混合物)。因此测定糖化白蛋白更能准确反映血糖控制的水平。临床上可以采用酶联免疫吸附法、高效液相色谱法、果糖胺法、酮胺氧化酶法来测定糖化血清蛋白或糖化白蛋白，其中用果糖胺法测定糖化血清蛋白和采用酮胺氧化酶法测定糖化白蛋白最为常用。

血清中的葡萄糖与白蛋白及其他血清蛋白分子N末端的氨基酸可形成高分子酮胺结构，该酮胺结构能在碱性环境中与硝基四氮唑蓝( NBT)发生还原反应，生成有色物质甲臜，以1-脱氧-1-吗啉果糖( DMF)为标准参照物，进行比色测定。

无水碳酸钠9.54g，碳酸氢钠0.84g;溶于蒸馏水并稀释至1000ml。

称取氯化硝基四氮唑蓝100mg，用上述缓冲液溶解并稀释至1000ml，置4℃冰箱保存，至少可稳定3个月。

称取DMF 99.6mg，溶于40g/L牛血清白蛋白溶液100ml中。

测定管加待检血清(血浆) 0.1ml，空白管加蒸馏水0.1ml，各管加37℃预温的NBT试剂4ml，混匀，置37℃水浴15分钟，立即取出，流水冷却(低于25℃)。冷却后15分钟内，用可见紫外分光光度计波长550nm，比色杯光径1.0cm，以空白管调零，读取测定管吸光度。从标准曲线查得测定结果。以果糖胺“mmol/L”报告。

取4mmol/L DMF标准液，用牛血清白蛋白溶液( 40g/L)稀释成1mmol/L、2mmol/L、3mmol/L、4mmol/L，并以牛血清白蛋白溶液( 40g/L)为空白，与测定管同样操作，读取各浓度DMF相应的吸光度。以DMF浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，制成标准曲线。浓度在4mmol/L以内与吸光度呈线性关系，从标准曲线查得测定结果。

成人果糖胺: 1.65～2.15mmol/L。

该法经济、快速，适用于自动生化分析仪，但pH、反应温度、反应时间，对本实验影响较大，必须严格予以控制。

当血清白蛋白＜30g/L或尿蛋白＞1g/L时，该法结果不可靠。血液中的胆红素、乳糜和低分子物质会对测定造成干扰。因此该法不适用于肾病综合征、肝硬化、异常蛋白血症或急性时相反应后的患者。

糖化白蛋白的酮胺键能与酮胺氧化酶发生特异性的酶促反应，释放过氧化氢，在过氧化物酶作用下使色原底物基质发生呈色反应，用紫外可见分光光度计测定吸光度的变化，计算出糖化白蛋白的浓度。再测定出血清中白蛋白的浓度，将糖化白蛋白浓度除以血清白蛋白浓度算出糖化白蛋白的百分比值( %)。

自动生化分析仪试剂成分及其终浓度如下:

R1前处理液:酮胺氧化酶　30U/ml

TODB　2.0mmol/L

R2酶液:过氧化物酶　40KU/ml

4-AA　5.0mmol/L

R1前处理液:琥珀酸　120mmol/L

R2发色液: BCP　0.13g/L

目前各商品试剂与上述试剂相似，试剂组成及各成分浓度存在一定差异。

测定过程为血清样品与R1混合，温育，加入R2，在添加R2前和添加后的5分钟，以蒸馏水为对照，在主波长为546nm/副波长为700nm时测定吸光度，计算出吸光度的变化。与定标品的值进行对照，计算出样本中的糖化白蛋白浓度。主要反应条件如下:

样品-试剂最终比例　1∶40

反应温度　37.0℃

温育时间　10分钟

主波长　546nm

吸光度监测时间　10分钟

不同实验室具体反应条件会因所使用的仪器和试剂而异，在保证方法可靠的前提下，应按仪器和试剂说明书设定测定条件，进行定标品、质控样品和血清样品分析。

参阅本篇第一章第二节血清白蛋白测定。

成人糖化白蛋白: 10.8%～17.1%(此参考区间引自《临床生物化学检验》第5版)。

该法可用于自动化生化分析仪，精密度高、准确性好，胆红素对其干扰较小。

测定糖化血清蛋白水平可以反映患者2～3周前的血糖控制情况，白蛋白的半衰期为20天左右，不受临时血糖浓度波动的影响，是判断糖尿病患者在一定时间内血糖控制水平的一个较好指标。同一患者前后连续检测结果的比较更有临床价值。一些特殊情况下，如透析性贫血、肝病、糖尿病合并妊娠、降糖药物调整期等，结合糖化白蛋白能更准确地反映短期内的平均血糖变化，特别是当患者体内有血红蛋白变异体(如HbS或HbC)存在时，会使红细胞寿命缩短，此时糖化白蛋白检测则更有价值。